測定微生物自含硫氨基酸（sulfur-containing amino acid）或無(wú)機硫化物（inorganic sulfur compounds）等受質(zhì)中產(chǎn)生硫化氫（hydrogen sulfide）的能力。

微生物產(chǎn)生硫化氫之發(fā)酵途徑，主要有兩種。

途徑一：

硫化氫由培養基中蛋白質(zhì)成份之半胱氨酸（cysteine）還原而產(chǎn)生。 蛋白質(zhì)經(jīng)微生物酵素分解，形成含硫之半胱氨酸，此氨基酸經(jīng)半胱氨酸脫硫酵素（cysteine desulfurase）作用失去硫原子，而自水分子加入氫形成硫化氫。

途徑二：

硫化氫由無(wú)機硫化合物如硫代硫酸鹽（thiosulfate；S2O32-）、硫酸鹽（sulfate；SO42-）或亞硫酸鹽（sulfite；SO32-）等所產(chǎn)生，當培養基含硫代硫酸鈉時(shí)，有些微生物可將其還原為亞硫酸鹽，并釋出硫化氫。

本實(shí)驗使用SIM培養基，內含蛋白質(zhì)與硫代硫酸鈉作為硫受質(zhì)，另含硫酸銨亞鐵（ferrous ammonium sulfate；Fe(NH4)2SO4）作為硫化氫指示劑，（硫化氫為無(wú)色氣體，不易察覺(jué)，硫酸銨亞鐵之亞鐵離子可與硫化氫反應生成不溶性硫化亞鐵之黑色沉淀。）培養基含0.3﹪瓊脂使成半固體，以增強厭氧呼吸，亦可觀(guān)察微生物之運動(dòng)性，如具運動(dòng)性，則微生物生長(cháng)沿接種線(xiàn)向四周擴散，使培養基呈混濁，如無(wú)運動(dòng)力，則生長(cháng)于接種線(xiàn)。